产品货号：
BTN90403
中文名称：
蛋白胶中量回收试剂盒
英文名称：
Midi Protein Gel Extraction Kit
产品规格：
5次
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品用于凝胶蛋白的中量回收，适用于变性PAGE胶（如SDS-PAGE）和非变性PAGE胶。
保存：室温，有效期1年。
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- 简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。
- 每次可以处理1g的PAGE胶（具体含多少蛋白质取决于上样的浓度）。
- 回收率一般在50～90%之间（跟蛋白质亲水性、大小、洗脱时间相关）。
- 跟后续的实验兼容，包括2-D电泳、质谱测序、EMSA或其它活性检测实验等。
| 组分 | 规格 |
| 蛋白胶中量纯化溶液A | 5mL |
| 蛋白胶中量纯化溶液B | 50mL |
| 20mL塑料注射器 | 5只 |
保存：室温，有效期1年。
- 按常规方法进行变性（SDS-PAGE）或非变性PAGE蛋白电泳。
- 切取含目的蛋白条带的PAGE胶。
- 尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率。
- PAGE胶固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。
- 尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率。
- 将切下的、重量不超过1克的胶块转移到20mL塑料注射器中（不安装针头）。用塑料注射器推杆将胶块从端口挤压出去，使之变成细小的碎片，用自备的15mL塑料离心管收集这些破碎的凝胶颗粒。也可用其他方法捣碎PAGE胶条，包括液氮研磨。胶条越碎，蛋白回收率越高。
- 加入1mL蛋白胶中量纯化溶液A，4℃脱色摇床上摇晃洗脱至少16小时（过夜）。此期间最好将蛋白胶中量纯化溶液B放在-20℃冰箱预冷待用。
- 10000g离心10分钟，转移上清（含回收蛋白）到新的10～15mL的塑料离心管中。
- 不要吸取PAGE胶碎片。
- 加入5倍体积的预冷的蛋白胶中量纯化溶液B，摇晃混匀。
- -20℃放置至少30分钟。
- 室温12000g离心20分钟，小心弃上清，不要吸走沉淀。
- 一定要检查使用的离心管是否能够耐受此离心力，如果不能建议将溶液分到1.5mL的塑料离心管中再在台式离心机上进行离心处理。
- 室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在跟后续测试兼容的缓冲液中，直接用于后续实验（2-D电泳、质谱测序等）。
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